消化
1、准备6个凯氏烧瓶，标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g，浓硫酸2.0mL，30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照，用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质，对样品测定进行校正。4、5、6号烧瓶中加入蒸馏水1.0mL代替样液，其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同。2、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上，接好抽气装置。先用微火加热煮沸，此时烧瓶内物质炭化变黑，并产生大量泡沫，务必注意防止气泡冲出管口。待泡沫消失停止产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至溶液澄清后，再继续加热使消化液微沸15min。在消化过程中要随时转动烧瓶，以使内壁粘着物质均能流入底部，以保证样品完全消化。消化时放出的气体内含SO2，具有强烈性，因此自始自终应打开抽水泵将气体抽入自来水排出。整个消化过程均应在通风橱中进行。消化完全后，关闭火焰，使烧瓶冷却至室温。
LY/T1243-1999 森林土壤阳离子交换量的测定
HJ 717-2014 土壤质量 全氮的测定 凯氏法
KDN系列凯氏定氮仪，采用微电脑进行过程控制。
自动式蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水。
各种安全保护：消化管安全门装置，蒸汽发生器缺水报警，水位检测故障报警。
定氮仪外壳采用特制喷塑钢板，工作区域采用ABS防腐面板，防化学试剂腐蚀和机械损坏表面，耐酸耐碱。
水位检测，低水位报警，仪器控制系统故障能自动断电。
采用自来水水源，适应性广，对实验要求低。
定氮仪技术参数：
测定品种：粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等；
定氮仪工作方式：半自动
进水方式：自来水、蒸馏水两种进水方式，使用区域广泛
样品量：固体0.20g～2.00g；半固定2.00g～5.00 g液体10.00ml～25.ml
定氮仪测定范围：0.1mgN～200mgN(毫克氮)
回收率：≥99%（相对误差，包括消化过程）；
蒸馏速度：5～ 15分钟/样品 （按样品量而定 ）
冷却水消耗：3L/分钟
重复率：相对标准偏差<±1%
供电：AC220V/50Hz
功率：1000w
供水：水压大于1.5MPa；水温小于20度
外形尺寸：380*320*670mm
定氮仪重量：20kg
凯氏定氮仪，采用微电脑进行过程控制，包括手动模式和自动模式，可根据您的需要自行设定和切换：
自动模式下：一次完成加碱、加硼酸、蒸馏，氨气吸收整个过程，加硼酸和加碱的体积以及蒸馏和吸收过程的时间都可以自行设定。
手动模式下：加硼，加碱 和蒸馏吸收三个过程可以单独人工操作，体积，时间自行控制，满足专业用户需求。
2.大屏幕点阵式液晶显示，全中文菜单，触摸式按钮，操作简捷方便。
3.自动式蒸馏控制、自动加水、自动水位控制、自动停水。
4.各种安全保护：消化管安全门装置，蒸汽发生器缺水报警，水位检测故障报警。
5.可存储操作程序数量：250个。
6.仪器外壳采用特制喷塑钢板，工作区域采用ABS防腐板，防化学试剂腐蚀和机械损坏表面，耐酸耐碱。
7.水位检测、低水位报警，自动断电。仪器控制系统故障能自动断电。
8.标配里不含消化炉，消化炉为选配
测定品种：粮食、食品、乳制品、饮料、饲料、土壤、水、药物、沉淀物和化学品等；
工作方式：自动（不含滴定）
进水方式：自来水、蒸馏水两种进水方式，使用区域广泛
样品量：固体0.20g～2.00g；半固定2.00g～5.00 g液体10.00ml～25.ml
测定范围：0.1mgN～200mgN(毫克氮)
回收率：≥99%（相对误差，包括消化过程）；
蒸馏速度：5～ 15分钟/样品 （按样品量而定 ）
冷却水消耗：3L/分钟
重复率：相对标准偏差<±1%
供电：AC 220V/50Hz
功率：1000w
供水：水压大于1.5MPa；水温小于20度
外形尺寸：430*360*760mm
重量：25kg
2、无机氮标准样品的蒸馏吸收
由于定氮操作繁琐，为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术，初学者宜先用无机氮标准样品进行反复练习，再进行**氮未知样品的测定。常用巳知浓度的标准硫酸铵测试三次。 取洁净的100mL锥形瓶五只，依次加入2%硼酸溶液20mL，次甲基蓝-甲基红混合指示剂（呈紫红色）3～4滴，盖好瓶口待用。取其中一只锥形瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸没在溶液中。注意：在此操作之前必须先打开收集器活塞，以免锥形瓶内液体倒吸。准确吸取2mL硫酸铵标准液加到玻杯中，小心提起棒状玻塞使硫酸铵溶液慢慢流入蒸馏瓶中，用少量蒸馏水冲洗小玻杯3次，一并放人蒸馏瓶中。然后用量筒向小玻杯中加入10 mL 30%NaOH溶液，使碱液慢慢流入蒸馏瓶中，在碱液尚未完全流入时，将棒状玻塞盖紧。向小玻杯中加约5mL蒸馏水，再慢慢打开玻塞，使一半水流入蒸馏瓶，一半留在小玻杯中作水封。关闭收集器活塞，加热蒸气发生器，进行蒸馏。锥形瓶中的硼酸-指示剂混合液由于吸收了氨，由紫红色变成绿色。自变色时起，再蒸馏3～5min，移动锥形瓶使瓶内液面离开冷凝管下口约lcm，并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口，再继续蒸馏1min，移开锥形瓶，盖好，准备滴定。 在一次蒸馏完毕后，移去煤气灯，夹紧蒸气发生器与收集器间的橡胶管，排除反应完毕的废液，用水冲洗小玻杯几次，并将废液排除。如此反复冲洗干净后，即可进行下一个样品的蒸馏。按以上方法用标准硫酸铵再做两次。另取2mL蒸馏水代替标准硫酸铵进行空白测定二次。将各次蒸馏的锥形瓶一起滴定。
GBT 5511-2008 谷物和豆类 氮含量测定和粗蛋白质含量计算 凯氏法
GB 5009.5-2010 食品中蛋白质的测定
3、未知样品及空白的蒸馏吸收
将消化好的蛋白样品三支，空白对照液三支，依次作蒸馏吸收。 加5mL热的蒸馏水至消化好的样品或空白对照液中，通过小玻杯加到反应室中，再用热蒸馏水洗涤小玻杯3次，每次用水量约3mL，洗涤液一并倒入反应室内。其余操作按标准硫酸铵的蒸馏进行。 由于消化液内硫酸钾浓度高而呈粘稠状，不易从凯氏烧瓶内倒出，必须加入热蒸馏水5 mL稀释之，如果有结晶析出，必须微热溶解，趁热加入玻杯，使其流入反应室。此外，还应当注意趁仪器洗涤尚未完全冷却时立即加入样品或空白对照液，否则消化液通过冷却的管道*析出结晶，造成堵塞。
滴定
样品和空白蒸馏完毕后，一起进行滴定。打开接受瓶盖，用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的标准盐酸溶液进行滴定。待滴至瓶内溶液呈暗灰色时，用蒸馏水将锥形瓶内壁四周淋洗一次。若振摇后复现绿色，应再小心滴入标准盐酸溶液半滴，振摇观察瓶内溶液颜色变化，暗灰色在一二分钟内不变，当视为到达滴定终点。若呈粉红色，表明已追赶滴定终点，可在已滴定耗用的标准盐酸溶液用量中减去0.02mL，每组样品的定氮终点颜色必须完全一致。空白对照液接受瓶内的溶液颜色不变或略有变化尚未出现绿色，可以不滴定。记录每次滴定耗用标准盐酸溶液毫升数，供计算用。
NY/T295-1995 中性土壤阳离子交换量和交换性盐基的测定
LY/T1243-1999 森林土壤阳离子交换量的测定
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